▲图 2. 不同规格的 Millistak+® Pod 深层过滤器和 PolysepTM II 表面过滤器图
Vero 细胞微载体悬浮培养条件下的病毒澄清工艺
在 Vero 细胞微载体悬浮培养的包膜病毒疫苗澄清工艺中,考虑到简化工艺步骤和优越的浊度控制,我们使用了具有较强吸附能力的深层滤器Millistak+® HC Pro C0SP,当高载量使用时(500L/m2以上),总回收率则达到 90%,浊度 20NTU以内。可见虽然 C0SP 吸附能力很强,但由于其同时具有高载量的特点,从而保证了较高的回收率。
▲图 3. 微载体 Vero 细胞生产包膜病毒澄清工艺中 C0SP 滤器载量和产品回收率图
Millistak+® HC Pro 系列深层滤器,用合成材质聚丙烯酸纤维和二氧化硅代替了传统的硅藻土和纤维素,在单抗和疫苗澄清中,载量通常是传统深层滤器的两倍以上。同时由于人工合成材质相比传统材质更为清洁,在工艺放大后,可以节省大量的冲洗用水,节约成本和时间。通常 C0SP 用于高密度细胞收获液的单级澄清。
▲图 4. 不同规格的 Millistak+® HC Pro 深层过滤器图
腺病毒病毒澄清工艺
腺病毒病毒广泛应用于疫苗和基因治疗领域,在腺病毒的澄清工艺中,默克不同系列的深层滤器在高细胞密度和裂解细胞的情况下都能到达良好的澄清效果,并保持很高的回收率。下图是 Millistak+® HC 和 Millistak+® HC Pro 系列滤器在腺病毒澄清中的常规表现。
▲图 5. AAV 澄清工艺中 Millistak+® HC 和 Millistak+® HC Pro 深层过滤器载量和产品回收率
在病毒疫苗的澄清工艺中,根据不同的细胞培养方式、病毒类型、病毒原液收获模式,默克Millistak+® Pod 深层滤器和 PolysepTM II 表面滤器都可以很好的满足工艺需求,并可实现从小试到生产线性放大。而非动物源 Bensonase® 核酸内切酶,能简单快速地降低工艺过程中核酸残留,为疫苗安全性提供了强有力的保障。