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默克密理博独家iPS技术及领先解决方案简介

1694 人阅读发布时间:2010-12-01 11:49

20068月,Shinya Yamanaka[1]领导的研究小组在日本京都大学(Kyoto University)利用逆转录病毒,将4种转录因子Oct4Sox2Klf4 c-Myc转入小鼠成纤维细胞,首次将体细胞直接重编程为胚胎干细胞样的多潜能干细胞,即诱导多能干细胞(Induced pluripotent stem cells, iPSCs),震惊了全世界,也标志了体细胞重编程为iPS细胞技术的诞生。由于细胞重编程技术对人类疾病和细胞分化等过程的重大意义,以及直接避开了伦理和免疫排斥等问题,iPS技术的研究迅速在全世界展开。迄今为止,人[2, 3]、大鼠[4, 5]、猪[6, 7]、猴[8]和兔[9]等物种的iPS细胞系皆已建立,并已成功的应用于疾病模型的建立与机理研究、药物的发现与评价等方面,可见iPS技术在人类疾病的临床治疗等方面极具应用前景。

密理博公司作为全球生命科学的领先者,从2008年开始连续3年举办“干细胞与表观遗传学”亚洲生物高峰论坛,并且于2010915~17日与中科院上海干细胞库联合举办一期“iPS技术专题培训班”,有志于让更多从事干细胞生物学、表观遗传学、医学等相关领域的科研工作者更快更好的了解iPS技术。此次“iPS技术专题培训班”采用实验操作与讲座学习相结合的方式,详细讲解了iPS技术相关的慢病毒的包装,滋养层细胞的制备和铺制,iPS细胞的产生、培养和鉴定等实验技术,也为学员们在iPS相关的实验过程中遇到的各种疑难问题做了详细解答。此外,培训中也展示了密理博在iPS研究领域提供的全新工具及解决方案。

在以往的iPS技术中,病毒的滴度不高且多个病毒的导入都使得iPS细胞转化效率极低,而Millipore和波士顿大学合作研发的STEMCCA试剂盒,采用单一病毒载体提供大于3×108 IFU/ml的高低度病毒,同时表达4个转录因子(Yamanaka Factors:Oct4,Klf4,Sox2和cMyc),既简单方便,更大大减少了病毒整合所带来的风险。该技术的技术要点主要是2A肽技术。

在筛选iPS克隆时,除了最常用的碱性磷酸酶检测试剂盒,Millipore还新推出了Human iPS Selection Kit,可用于hESC和Fully Reprogrammed human iPSC的多能性监测,该试剂盒可以更直观的监测iPS细胞克隆,简单快速的进行活细胞筛选,且非破坏性,筛选后的iPSC可继续培养、传代。同时,Millipore公司提供从体细胞细胞系,重编程试剂盒,筛选试剂盒,以及一系列的鉴定试剂盒等iPS技术相关的全套产品,为从事该领域研究的科研工作者提供了全方面的周到服务。

产品及技术支持热线:400-889-1988

联系作者:china_bioscience_marketing@millipore.com

参考文献:

1. Takahashi K, Yamanaka S. Induction of pluripotent stem cells from mouse embryonic and adult fibroblast cultures by defined factors. Cell, 2006, 126(4):663676

2. Takahashi K, Tanabe K, Ohnuki M, et al. Induction of pluripotent stem cells from adult human fibroblasts by defined factors. Cell, 2007, 131(5):861872

3. Yu J, Vodyanik M A, Smuga-Otto K, et alScience, 2007, 318(5858):1917~1920. Induced pluripotent stem cell lines derived from human somatic cells.

4. Liao J, Cui C, Chen S, et alGeneration of induced pluripotent stem cell lines from adult rat cells. Cell stem cell, 2009, 4(1):1115.

5. Li W, Wei W, Zhu S, et al. Generation of rat and human induced pluripotent stem cells by combining genetic reprogramming and chemical inhibitors. Cell Stem Cell, 2009, 4(1):1619

6. Wu Z, Chen J, Ren J, et alGeneration of Pig Induced Pluripotent Stem Cells with a Drug-Inducible System. J Mol Cell Biol, 2009, 1(1):4654.

7. Esteban Ma, Xu J, Yang J, et al. Generation of induced pluripotent stem cell lines from tibetan miniature pig. J Biol Chem, 2009, 284(26):1763417640

8. Liu H, Zhu F, Yong J, et al. Generation of induced pluripotent stem cells from adult rhesus monkey fibroblasts. Cell Stem Cell, 2008, 3(6):587590

9. Honda A, Hirose M,Hatori M, et al. Generation of induced pluripotent stem cells in rabbits: potential experimental models for human regenerative medicine. J Biol Chem, 2010 Jul 29, M110.150540 


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