死亡之舞

亨廷顿舞蹈症（Huntington』 s disease, HD），又名慢性进行性舞蹈症，是一种缓慢起病的遗传性神经退化疾病。

亨廷顿舞蹈症表现为短暂不能控制的装鬼脸、点头、手指跳动。随病情加重，不随意运动恶化，出现舞蹈样不自主运动、吞咽困难等症状。亨廷顿舞蹈症通常在发病 15～20 年后死亡，对亨廷顿舞蹈病的治疗目前仅限于针对症状的治疗，没有方法可以预防发病或减缓进展，因此国内外医学界称之为「死亡之舞」。
 

图片来源：https://trypanophobia.wordpress.com/2012/10/30/darker-dancing/  

停止死亡之舞！

亨廷顿舞蹈症由常染色体显性突变引起，在亨廷顿基因（HTT）的第一个外显子中存在 CAG 三核苷酸的异常重复扩增，大脑中不断聚集突变蛋白（mHTT），最终导致神经功能失调和退化。

通过基因治疗，靶向抑制突变 CAG 重复序列，抑制 mHTT 表达，或可成为亨廷顿舞蹈症治疗的关键。

「纳米级手术刀」扭转局面
 

2019 年 6 月， Nature Medicine 发文报道，通过对转基因 tgHD 小鼠的研究发现，重组 AAV 将 ZFP-TFs 递送给原代神经元，可实现突变 mHTT mRNA 和 mHTT 蛋白降低 98% 以上，但对正常 HTT 表达没有影响。通过脑脊液中 mHTT 蛋白检测发现，mHTT 蛋白呈现剂量依赖性减少，一次注射就可以使 mHTT 在相当长一段时间内稳定。

2020 年 2 月，Nature Communications 在线发文，通过重组 AAV 将 AAV-GFAP-Cre、AAV-DIO-NeuroD1 和 AAV-DIO-Dlx2 混合注射在纹状体中，可将纹状体星形胶质细胞成功转化为神经元。

近期，uniQure 公司宣布其基于 AAV5 的候选基因疗法 AMT-130 用于治疗亨廷顿病已获得 FDA 研究性新药（IND）批准，允许开始其 I/II 期临床研究。

不治之症或将在基因治疗手中，扭转局面。

mHTT 蛋白成为亨廷顿舞蹈症研究的最佳生物标志物之一

对亨廷顿舞蹈症患者脑脊液中疾病相关蛋白进行定量分析，有助于监测疾病进展和评估治疗干预的效果。伴随着疾病的进展，患者脑脊液中的 mHTT 浓度增加；治疗后 mHTT 蛋白浓度呈剂量性下降。mHTT 蛋白成为亨廷顿舞蹈症研究的最佳生物标志物之一。

病程最早期 mHTT 蛋白在脑脊液中浓度非常低，通常低至 fg/ml 级别，常规 Elisa 等蛋白检测方法无法检出这些蛋白。治疗晚期检测中，同样也会出现这一问题。因此，在病程监控和治疗效果评价中，通过超高灵敏度的蛋白检测方法实现 fg/ml 低丰度表达蛋白的定量显得尤为重要。
 

图：SMC™ 超敏技术对不同年龄 tgHD 小型猪脑脊液中 mHTT 蛋白进行检测，年龄与 mHTT 水平呈正相关（Molecular Therapy，2018）

默克 SMC™超敏检测实现 mHTT 蛋白飞克级定量

默克 SMC™ 单分子免疫检测平台，可实现 10 μL 脑脊液中 mHTT 蛋白 fg/ml 准确定量。针对 mHTT-Q45(1-573) 定制开发的 SMC™试剂盒最低检测下限 LOD 可达 0.043 pg/mL （数据来自默克 R&D 实验室），满足样本中 mHTT 基线的全部检出。

 

图 2：SMC™独特的检测洗脱步骤和专利的激光单分子计数技术，有效降低背景信号值，增强检测信号，实现飞克级蛋白定量

经验分享：默克 SMC™ mHTT 超敏试剂盒开发经验分享

试剂盒的开发往往需要不断的尝试与经验积累。如何开发属于自己的 SMC™超敏试剂盒，提升自有抗体对的检测灵敏度 ？在开发 SMC™超敏试剂盒的过程中，需要注意哪些事项 ？ 默克 CAST（customer assay R&D）团队主管 Sarah 将与您分享相关话题。Sarah 拥有 30 多年的 Bio-pharm 研发经验和丰富的 SMC™超敏试剂盒开发经验。

Sarah 将与大家分享如下话题：

• SMC™单分子免疫检测技术实现 HTT 痕量检测的原理
• 如何达到 mHTT 和总 HTT 蛋白的 fg/ml 级定量
• SMC™超高灵敏度试剂盒的开发与验证

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